熒光探針,分子探針,核酸/蛋白質(zhì)標(biāo)記、細(xì)胞檢測(cè)等技術(shù)和產(chǎn)品
普通會(huì)員
產(chǎn)品價(jià)格面議
產(chǎn)品品牌AAT Bioquest
最小起訂≥200 slides
供貨總量600 slides
發(fā)貨期限自買(mǎi)家付款之日起 3 天內(nèi)發(fā)貨
瀏覽次數(shù)32
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更新日期2024-11-04 15:43
會(huì)員級(jí)別:企業(yè)會(huì)員
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企業(yè)二維碼: 企業(yè)名稱(chēng)加二維碼
品牌: |
AAT Bioquest |
所在地: |
陜西 西安市 |
起訂: |
≥200 slides |
供貨總量: |
600 slides |
有效期至: |
2025-10-30 |
貨號(hào): |
11070 |
規(guī)格: |
200 slides |
英文名稱(chēng): |
XFD488 tyramide reagent |
產(chǎn)品參數(shù)
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 酪an信號(hào)放大(TSA)是一種特別通用且功能強(qiáng)大的酶擴(kuò)增技術(shù),可以使檢測(cè)有更高的靈敏度.
2. 免疫組織化學(xué)(IHC)應(yīng)用,使傳統(tǒng)的酶促擴(kuò)增程序足以實(shí)現(xiàn)足夠的抗原檢測(cè)。
3. 為了實(shí)現(xiàn)大的IHC檢測(cè),酪an用熒光團(tuán)預(yù)標(biāo)記。
4.AF488酪an含有明亮的AlexaFluor®488,可以使用標(biāo)準(zhǔn)FITC過(guò)濾器套件輕松檢測(cè).
產(chǎn)品概述
適用范圍
AF488酪an是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的熒光探針,適合標(biāo)記抗體或蛋白。應(yīng)用于細(xì)胞或組織。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商,為您提供的AF488酪an。
注意事項(xiàng):該產(chǎn)品不能進(jìn)行活體成像。
適用儀器
熒光顯微鏡
Ex: FITC濾波片組
Em: FITC濾波片組
推薦孔板: 黑色透明底板
濾波片: FITC濾波片組
產(chǎn)品名稱(chēng):AF488 酪an(XFD488 tyramide reagent)
產(chǎn)品貨號(hào):11070
產(chǎn)品規(guī)格:200 slides
品 牌:AAT Bioquest\
儲(chǔ)存條件:在零下15度以下保存, 避免光照
實(shí)驗(yàn)方案
染色樣品示例
概述
1.固定/透化/阻斷細(xì)胞或組織
2.在封閉緩沖液中加入一抗
3.加入HRP偶聯(lián)的二抗
4.準(zhǔn)備酪an工作溶液,室溫下在細(xì)胞或組織中5-10分鐘
操作步驟
在沒(méi)有額外說(shuō)明的情況下,所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1.Tyramide原液(200X):
將100μLDMSO加入小瓶中并充分混合。
注意:未使用的Tyramide原液可以在2-8℃下儲(chǔ)存。
2.Tyramide工作溶液(1X):
將100μLTyramide原液加入20 mL含有0.003%H2O2的緩沖液中。
注意:Tris Buffer,pH = 7.4可用于獲得佳性能。
注意:Tyramide工作溶液應(yīng)立即使用。
注意:20 mL溶液適用于200次測(cè)試。
3.細(xì)胞固定和透化
3.1在室溫下用PBS中的3.7%甲醛或多聚甲醛固定細(xì)胞或組織20分鐘。
3.2用PBS沖洗細(xì)胞或組織兩次。
3.3在室溫下用0.1%Triton X-100溶液使細(xì)胞透化1-5分鐘。
3.4用PBS沖洗細(xì)胞或組織兩次。
4.過(guò)氧化物酶標(biāo)記
4.1任選:通過(guò)在過(guò)氧化物酶猝滅溶液(例如3%過(guò)氧化氫)中孵育細(xì)胞或組織樣品10分鐘來(lái)淬滅內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性。 在室溫下用PBS沖洗兩次。
4.2可選:如果使用HRP偶聯(lián)的鏈霉抗生物素蛋白,建議通過(guò)生物素阻斷緩沖液阻斷內(nèi)源性生物素。
4.3用優(yōu)選的封閉溶液(例如含有1%BSA的PBS)在4℃下封閉30分鐘。
4.4取出封閉溶液,加入在推薦抗體稀釋液中稀釋的一抗在室溫下60分鐘或在4°C下過(guò)夜。
4.5用PBS洗滌三次,每次5分鐘。
4.6向每個(gè)樣品中加入100μL二抗-HRP工作溶液,在室溫下孵育60分鐘。
注意孵育時(shí)間和濃度可根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度而變化。
4.7用PBS洗滌三次,每次5分鐘。
5.Tyramide標(biāo)記
5.1為每個(gè)樣品準(zhǔn)備并應(yīng)用100μLTyramide工作溶液,并在室溫下孵育5-10分鐘。
注意:如果您觀察到非特異性信號(hào),可以縮短Tyramide的孵育時(shí)間。 您應(yīng)該在不同的孵育時(shí)間點(diǎn)使用陽(yáng)性和陰性對(duì)照樣品優(yōu)化孵育期。 或者您可以在工作溶液中使用較低濃度的Tyramide。
5.2用PBS沖洗三次。
6.熒光成像
6.1根據(jù)需要對(duì)細(xì)胞或組織樣本進(jìn)行計(jì)數(shù)。 AAT提供了一系列細(xì)胞核復(fù)染試劑,如表1所列。按照試劑提供的說(shuō)明進(jìn)行操作。
6.2使用具有抗褪色特性的安裝介質(zhì)安裝蓋玻片。
6.3使用適當(dāng)?shù)倪^(guò)濾器組可視化來(lái)自Tyramide標(biāo)簽的信號(hào)。
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